简述药敏试验（K-B法）原理、步骤、结果及意义；② 简述液体培养基接种方法。

药敏试验（K-B法）原理、步骤、结果及意义

1. 原理

药敏试验（Kirby-Bauer法），也称为抗生素敏感性试验，是一种快速测定细菌对不同抗生素是否敏感的方法。实验通过观察微生物在含有特定抗生素的琼脂平板上的生长情况来判断细菌对抗生素的反应。

步骤

1. 准备

   • 将待测细菌株标准化至特定浓度（如0.5 McFarland标准的菌悬液）。
   • 准备好含有不同浓度抗生素的标准纸片。

2. 接种平板

   • 取液体培养基琼脂倒入无菌平皿。
   • 用棉签或无菌套管将菌液滴于平板上薄薄涂上一层。

3. 放置纸片

   • 将浸有抗生素的纸片放在琼脂表面，并轻轻压下。

4. 培养

   • 将摆放好纸片的平皿倒置放入37°C恒温培养箱培养16至18小时。

5. 读取结果

   • 结束培养后，检查每个纸片周围出现的抑菌环大小。

6. 判断抗药性

   • 根据抑菌环直径的大小（和指导上的指南比对）来判断细菌对抗生素是敏感、中介还是耐药。

2. 结果及意义

• 敏感：较小的抑制区域说明细菌对特定抗生素敏感。
• 中介：中间的抑制区域暗示抗生素可能有疗效，需进一步的药物敏感检测。
• 耐药：较大的抑制区域表明细菌耐药，该抗生素可能不是有效治疗药物。

药敏试验有助于合理选择抗生素，进行有效治疗，减少不必要的药品浪费，并改善治疗效果。

液体培养基接种方法

1. 平板划线法

1. 准备

   • 培养基凝固后，等待消毒后的接种工具冷却。
   • 使用无菌操作技术将含有活菌的分子器横切整个板面。

2. 接种

   • 用接种环沿一个方向轻轻划过培养基划线，并至少完成两条平行的复线以增加分离