MAS培养基怎么制作

Mannitol Salt Agar (MSA) 是一种选择性培养基，用于分离和鉴定革兰氏阳性菌，特别是金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。这种培养基含有高浓度的盐（通常是氯化钠），能够抑制许多细菌的生长，而金黄色葡萄球菌能够在这种高盐环境中生长。

以下是MSA培养基的基本配方和制作步骤：

1. 成分：

   • 20克甘露醇（Mannitol）
   • 75克氯化钠（NaCl）
   • 15克琼脂
   • 1升蒸馏水

2. 溶解：

   • 将所有成分称量后加入蒸馏水中，加热至完全溶解。

3. 调整pH值：

   • 调整pH值至7.2到7.4之间，以确保培养基的适宜环境。

4. 灭菌：

   • 将溶液在121°C下高压灭菌15至20分钟。

5. 冷却：

   • 灭菌后，让培养基在室温下冷却至50°C左右。

6. 倒板：

   • 在冷却过程中，将培养基倒入无菌的培养皿中，通常每个培养皿倒入15-20毫升。

7. 固化：

   • 让培养基在培养皿中自然固化。

8. 存储：

   • 培养基固化后，可以在2-8°C的条件下储存，直至使用。

9. 使用：

   • 使用时，将需要分离的细菌接种到MSA培养基上，然后在35-37°C下培养24-48小时。

MSA培养基的特点在于它的高盐浓度和甘露醇。金黄色葡萄球菌能够发酵甘露醇，产生酸性代谢产物，导致培养基上的菌落呈现黄色，并可能出现红色的沉淀环（由于酸性物质与培养基中的染料反应）。而非发酵甘露醇的细菌则不会影响培养基的颜色。

请注意，制作培养基时需要严格遵守无菌操作规程，以避免污染。如果你不熟悉实验室操作或没有相关经验，不建议自行尝试制作培养基。