香菇多糖的测定方法可以采用硫酸-苯酚法。具体步骤如下:
1.取适量样品,粉碎并过筛。
2.将0.5g左右样品加入100ml锥形瓶中,加入40ml 5%硫酸溶液,放入沸水中加热振荡15分钟,冷却至室温。
3.加入60ml 85%磷酸,并多次摇晃混合均匀。
4.用吸管取10ml上清液,加入另一锥形瓶中,加入2ml苯酚试液并充分混合。
5.再加入5ml浓硫酸,轻轻旋转几次,然后立即在水浴中加热10分钟。
6.冷却后在558nm处测定吸光度值。
7.按适当比例稀释后,按同样步骤进行空白试验,同时设置多组标准曲线,计算出每组的多糖含量。
需要注意的是,在操作过程中要注意安全,严格遵循实验室操作规程。