血琼脂培养基是一种用于培养和分离细菌的微生物培养基,特别是在识别和鉴定需要氧气的细菌时很有用。以下是制作血琼脂培养基的基本步骤:
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准备基础琼脂培养基:
- 基础琼脂培养基通常包含胰蛋白胨和酵母提取物。例如,可以使用以下配方:
- 10克胰蛋白胨
- 5克酵母提取物
- 5克氯化钠
- 15克琼脂粉
- 1000毫升蒸馏水
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溶解和灭菌:
- 将上述成分混合并加热至完全溶解,然后在高压灭菌锅中进行灭菌。
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冷却:
- 灭菌后,让培养基冷却至约50°C左右,以避免过热破坏血液成分。
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添加血液:
- 在冷却后的培养基中加入适量的无菌脱纤维羊血。通常,每升培养基添加50毫升的血液。
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混合:
- 轻轻但充分地混合培养基和血液,以确保血液均匀分布。
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倒板:
- 将混合好的培养基倒入无菌的培养皿中,每个培养皿通常倒入15-20毫升。
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固化:
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存储:
- 制作好的血琼脂培养基应立即使用或在2-8°C的条件下冷藏保存。
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使用:
- 培养基固化后,可以用于接种细菌样本,并在适宜的温度下培养。
请注意,血琼脂培养基的制备应在无菌条件下进行,以避免细菌污染。此外,血液可能含有病原体,因此在操作时应使用适当的个人防护装备,如手套、实验室大衣和护目镜,并在生物安全柜中进行操作。如果你没有相关的专业知识和实验室经验,不建议自行制作或使用血琼脂培养基。