牛肉膏蛋白胨培养基(Tryptone Bile X Glucose, TBX)是一种常用的微生物培养基,它含有牛肉膏和胰蛋白胨作为主要的氮源和碳源,以及适量的无机盐,可以用于培养多种肠道细菌,尤其是大肠杆菌和其他革兰氏阴性菌。
以下是制作牛肉膏蛋白胨培养基的基本步骤和配方:
配方:
- 牛肉膏:10克
- 胰蛋白胨(Tryptone):5克
- 氯化钠(NaCl):5克
- 胆汁酸盐:1.5克
- 新鲜酵母浸膏(可选):1克
- 葡萄糖:1克
- 蒸馏水:1000毫升
制作步骤:
- 称量原料:准确称取上述各种成分所需的量。
- 溶解:将牛肉膏、胰蛋白胨、氯化钠、胆汁酸盐和葡萄糖加入到蒸馏水中,加热搅拌使其完全溶解。
- 调整pH值:待培养基冷却至室温后,用pH计测量pH值,并用1N的盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.0-7.2。
- 灭菌:将培养基溶液分装到适当的容器中,如试管或烧瓶,并进行高压蒸汽灭菌,通常在121°C下灭菌15-20分钟。
- 冷却并倒置:灭菌后,让培养基冷却至50°C以下,然后倒置试管或封口烧瓶,以避免水分凝结。
注意事项:
- 在操作过程中应始终穿戴适当的防护装备,如实验室大衣、手套和护目镜。
- 使用无菌技术来避免污染培养基。
- 培养基应存放在2-8°C的冰箱中,避免重复冷冻和解冻,因为这可能会影响其质量和效果。
牛肉膏蛋白胨培养基可以用于细菌的选择性培养和鉴别,特别是在检测大肠杆菌和其他肠道致病菌时。此外,根据实验的具体需求,培养基的配方和制作步骤可能会有所变化。在使用前,建议查阅最新的实验手册或科学文献以获取最准确的信息。