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MS培养基的配制及灭菌,前言,参考文献

发布于 2023-06-15 22:37:22

前言:MS培养基是一种被广泛应用于植物组织培养中的培养基配方,它能够促进植物生长和增殖,也是许多基因转化实验的基础培养基。以下是MS培养基的配制及灭菌方法。

参考文献: Murashige, T., & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia plantarum, 15(3), 473-497.

配方: 对于1L的MS培养基,请按照以下的配方配制(pH 5.7):

  • Ca(NO3)2·4H2O 1,650 mg
  • KH2PO4 170 mg
  • MgSO4·7H2O 370 mg
  • NaNO3 1,900 mg
  • FeSO4·7H2O 22.3 mg
  • MnSO4·H2O 5.0 mg
  • ZnSO4·7H2O 186.0 μg
  • CuSO4·5H2O 25.0 μg
  • (NH4)6Mo7O24·4H2O 6.2 μg
  • CoCl2·6H2O 0.025 mg
  • sucrose 30 g
  • agar 8 g

将以上物质加入大约800mL的蒸馏水中,加热并搅拌至完全溶解,调整pH值到5.7左右,加入适量的蒸馏水至1L即可。

灭菌: 将配制好的MS培养基倒入对应的容器中,密封并放入高压灭菌器中,使用121°C温度下的压力灭菌法,将MS培养基灭菌30分钟即可。

同时,为了降低灭菌过程对MS培养基的影响,可以在灭菌之前将MS培养基分装成几个小瓶,在灭菌器中进行灭菌。这样做有助于减少持续高温对MS培养基的热敏性物质产生的影响。

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