培养基作为供微生物和细胞生长的重要介质,在使用之前需要进行严格的灭菌处理以确保无菌。以下是培养基常用的灭菌方法:
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高压蒸汽灭菌(Autoclaving):
- 这是最常用的培养基灭菌方法,通过将培养基置于高压锅(灭菌器)中,在121°C的温度下处理15至20分钟,利用饱和水蒸汽灭菌。
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过滤灭菌:
- 对于不能耐受高温的培养基成分,如一些蛋白质或某些热敏感的激素等,则使用过滤灭菌法,通常使用0.22微米或更小孔径的滤膜。
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微波灭菌:
- 在没有高压蒸汽灭菌设备的条件下,可以使用微波灭菌pad,但需要保证微波能均匀加热至全体积,以避免未灭菌完全的风险。
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干热灭菌:
- 适用于玻璃器皿的灭菌,将玻璃培养皿、瓶子放于烘箱中,控温160-170°C处理数小时以灭菌。
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煮沸灭菌:
- 对于复杂培养基的小批量制备,可以在实验室里直接用普通锅煮沸灭菌。
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化学灭菌:
- 不常见,但由于某些培养基含有不能热处理的成分,可以用如70%乙醇等挥发性消毒剂来进行表面灭菌。
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低温灭菌:
- 使用低温灭菌剂如环氧乙烷等,适用于浸泡不能承受高温处理的塑料制品或橡胶制品的灭菌。
每种灭菌方法都有其适用范围和局限性,选择合适的灭菌方法要根据培养基的组分和特性、灭菌设备条件以及实验要求来确定。对于大多数常规的微生物培养基来说,高压蒸汽灭菌是最常用、有效且实用的方法。对于包含对热敏感成分的特殊培养基,则可能需要选择过滤灭菌或者其他方法。